遂宁草本私护肉芽凝胶代加工承诺守信 汉方化妆品

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凝胶的种类及性质

聚酰胺凝胶:

是一种人工合成凝胶，是以酰胺为单位，由甲叉双酰胺交联成的，经干燥粉碎或加工成形制成粒状，控制交联剂的用量可制成各种型号的凝胶。交联剂越多，孔隙越小。聚酰胺凝胶的商品为生物胶一P(Bio-GelP)，由美国Bio-Rod厂生产，型号很多，从P-2至P-300共10种，Р后面的数字再乘1000就相当于该凝胶的排阻限度。

聚凝胶商品为Styrogel ，具有大网孔结构，可用于分离分子量1600到40，000，000的生物大分子，适用于有机多聚物，分子量测定和脂溶性天然物的分级，凝胶机械强度好，洗脱剂可用亚矾。

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凝胶

(一）凝胶的选择根据所需凝胶体积，估计所需干胶的量。一般葡聚糖凝胶吸水后的凝胶体积约为其吸水量的2倍，例如Sephadex G-20的吸水量为20，1克Sephadex G-200吸水后形成的凝胶体积约40ml。

凝胶的粒度也可影响层析分离效果。粒度细胞分离效果好，但阻力大，流速慢。一般实验室分离蛋白质采用100-200号筛目的的Sephadex G-200效果好，脱盐用Sephadex G-25、G-50，用粗粒，短柱，流速快。

(二）凝胶的制备商品凝胶是干燥的颗粒使用前需直接在欲使用的洗脱液中膨胀。为了加速膨胀，可用加热法，即在沸水浴中将湿凝胶逐渐升温至近沸，这样可大大中速膨胀，通常在1-2小时内即可完成。

特别是在使用软胶时，自然膨胀需24小时至数天，而用加热法在几小时内就可完成。这种方法不但节约时间，而且还可消毒，除去凝胶中污染的***和排除胶内的空气。

凝胶的样品溶液的处理

样品溶液如有沉淀应过滤或离心除去，如含脂类可高速离心或通过Sephadex G-15短柱除去。样品的粘度不可大，含蛋白为超过4%，粘度高影响分离效果。上柱样品液的体积根据凝胶床体积的分离要求确定。分离蛋白质样品的体积为凝胶床的1-4%(一般约0.5-2ml)，进行分族分离时样品液可为凝胶床的10%，在蛋白质溶液除盐时，样品可达凝胶床的20-30%。分级分离样品体积要小，使样品层尽可能窄，洗脱出的峰形较好。(五〉防止微生物的污染交联葡聚糖和琼脂糖都是多糖类物质，防止微生物的生长，在凝胶层析中十分重要，常用的抑菌剂有:

1)叠氨钠(NaN3）在凝胶层析中只要用0.02%叠氮钠已足够防止微生物的生长，叠氮钠易溶一水，在20℃时约为40%;它不与蛋白质或碳水化合物相互作用，因此叠氮钠不影响活力;不会改变蛋白质和碳水化合物的层析我特性。叠氮钠可干扰荧光标记蛋白质。2可乐酮[Cl3C-C(OH)(CH3)2]在凝胶层析中使用浓度为0.01-0.02%。在微酸性溶液中它的杀菌效果佳，在强碱性溶液中或温度高于60℃时易引起分解而失效。

3)代疏基水杨酸钠在凝胶层析中作为抑菌剂使用浓度为0.05-0.01%。在微酸性溶液中为有效。***离子可使代疏基的物质结合，因而包含疏基的蛋白质可在不同程度上降低它的抑菌效果。

(4)代盐在凝胶层析中使用浓度为0.001-0.01%。在微碱性溶液中抑效果佳，长时间放置时可与卤素、根离子作用而产生沉淀;还原剂可引起此化合物分解:含疏基的物质亦可降低或***它的抑菌作用。

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